rna酶抑制剂的目的是 「rna酶失活温度」

吴老邪

产品概述 RNase抑制剂是从大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂，它通过非共价键方式1:1与RNase A、B或C结合，从而抑制三种酶的活性，保护RNA不被降解。但对核糖核酸酶1、核糖核酸酶T1、S1核酸酶、核糖核酸酶H和曲霉来源核糖核酸酶无效。 RNase抑制剂经过RT-PCR、RT-qPCR、IVT-mRNA检验，能与各类商业化逆转录酶、各种DNA聚合酶和RNA聚合酶兼容。 与人源RNase抑制剂相比，鼠源RNase抑制剂不含两个对氧化非常敏感的半胱氨酸，因而具有更高的抗氧化性，使其在低浓度DTT（小于1 mM）下稳定。该特征使其适合用于不能添加高浓度DTT的反应（例如Real-timeRT-PCR）。 产品储存-25～-15℃储存，有效期2年（避免反复冻融）。 储存缓冲液:50 mM KCl,20 mM HEPES-KOH(pH 7.6 25°C),8 mM DTT and 50%glycerol. 活性定义:抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。 蛋白分子量:RNase抑制剂的分子量为50 kDa。 质量控制:核酸外切酶活性：40 U的本品和1μgλ-HindIII digest DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化； 核酸内切酶活性：40 U的本品和1μgλDNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化；切口酶活性：40 U的本品和1μg pBR322在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化； RNase活性：40 U的本品和1.6μg MS2RNA在37℃下反应4小时，电泳谱带不发生变化； 大肠杆菌DNA残留检测：40 U本品中残留的核酸经E.coli 16s rDNA特异性的TaqManqPCR检测，E.coli基因组残留≤0.1 pg/40 U。细菌内毒素（Endotoxin）：LAL-Test，中国药典2020版第四部凝胶限度试验法通则（1143），细菌内毒素含量≤10 EU/mg。 产品应用 本产品可广泛应用于任何可能存在RNase干扰的实验中，以避免RNA降解，如： 1.cDNA第一链合成，RT-PCR,RT-qPCR等； 2.在体外转录/翻译（如病毒体外复制体系）中保护RNA，防止降解； 3.在RNA分离纯化过程中抑制RNase的活性。 注意事项 1.剧烈振荡或搅拌会导致酶失活； 2.抑制剂的活性温度为25~55ºC，温度≥65ºC失活； 3.不抑制RNase H、RNase 1及RNase T1活性； 4.抑制RNase活性的pH范围较广（pH 5-9均有活性），在pH 7-8时表现最大活性。